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Soy Porfirio Ruiz  de microbitosblog, es un gusto anunciarte que el blog esta en proceso de renovarse, se actualizara la información de forma gradual, se contestaran comentarios pendientes, se subirá nuevo contenido sobre identificación bacteriana, preparación de medios de cultivo, enfermedades infecciosas, morfología colonial, microbiología básica; podcast, videos y libros cortos de microbiología; entre muchas cosas.

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Como Citar: Porfirio Ruiz (2021). (Titulo de la entrada o artículo), Microbitos Blog, www.microbitosblog.com

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Pseudomonas spp. su morfología colonial es característica de identificación en algunos medios de cultivo, por ejemplo en medio agar Cetrimida, es un bacilo curvo o recto, aislado o en pareja o cadenas cortas, Gram negativa (-) esta bacteria tiene motilidad positiva gracias a su flagelo (solo cuenta con uno en algunas especies cuentan con 2 o mas flagelos).

Características.

Pseudomonas spp. su morfología colonial es característica de identificación en algunos medios de cultivo, por ejemplo en medio agar Cetrimida, es un bacilo curvo o recto, aislado o en pareja o cadenas cortas, Gram negativa (-) esta bacteria tiene motilidad positiva gracias a su flagelo (solo cuenta con uno).

Tiene la capacidad de formar biofilm, tiene un ligero aroma a frutas y es una de las principales bacterias oportunistas causantes de infecciones nosocomiales nosocomiales, especialmente en heridas, quemaduras y cuando se presentan cepas mucoides hay una alta mortalidad en casos de fibrosis quística.

Taxonomía bacteriana

Filo: Proteobacteria
Clase: Gammaproteobacteria
Orden: Pseudomonadales
Familia: Pseudomonadaceae
Género: Pseudomonas

Antecedentes.

Schroeter (1872) le dio nombre de Bacterium aeruginosum, posteriormente en el año de 1894 el botánico alemán Wallter Migula da el nombre de un nuevo género llamado Pseudomonas , las describió como “células con órganos polares de la motilidad”.

Si nos referimos a la etimología griega pseudo (falso) y monas (unidad) osea "unidad falsa", estas palabras no tienen mucha coherencia, Migula no hablo a cerca de la etimología del término, sin embargo se cree que tomo como base el hecho de que las bacterias que ya conocía eran unidades bacterianas (células individuales sin flagelo), por lo tanto las Pseudomonas son parecidas a las unidades bacterianas (bacterias sin flagelo), debido a esto podríamos interpretar el nombre como "unidad falsa" ya que una unidad verdadera no tiene flagelo, algo confuso pero hasta cierto punto tiene sentido.  P. fluorescens posee mas de dos flagelos. (8)

Respecto a la etimología de Pseudomonas aeruginosa viene derivado de la palabra Aerugo ("el óxido de cobre o verdín" de color verde) y la palabra ōsus (indica abundancia) se llama así por el color azul verdoso de las colonias bacterianas.

Morfología microscópica.

Son bacilos cortos, en parejas, en cadenas o aislados, Gram (-), el flagelo polar monotrico no es visible en una tinción de Gram ya que el flagelo es muy delgado, para poderlo observar habrá que realizar un proceso de tinción especial llamado Tinción flagelar de Leifson-Clarck, generalmente el flagelo no se usa como identificación, sin embargo hay ocasiones que es necesario cuando las pruebas bioquímicas no son suficientes para identificar al género bacteriano te apoyas distinguiendo de las bacterias que no tienen flagelo.

Pseudomonas, Bacilos Gram negativo
En esta imagen se observa bacilos de cortos a largos, Gram (-), sin agrupación aparante.
Credito: Bacterioweb.

El tamaño de Pseudomonas está entre 0.5 μm y 0.8 μm de espesor por 1.5 μm y 3.8 μm de largo. No forma esporas.

Metabolismo bacteriano.

Tiene un metabolismo aerobio estricto-oxidativo, no fermenta carbohidratos, sus requerimientos nutricionales son sencillos prácticamente crece en agua.
Secreta sustancias coloridas hidrosolubles (1):

*Piocianina; Pigmento azulado.
*Pioverdina (Fluoresceína); tiene un color amarillo-verdoso ante luz UV es fluorescente.
*Piorrubina; Tiene una coloración roja y se favorece su producción a temperaturas menores a 37 °C y en un medio de cultivo con compuestos de hierro
*Piomelanina; Su color es marrón, aumenta su síntesis con temperatura menor a 37 grados Celsius y en ambiente con fuentes de Fe.

Pseudomonas_piocianina_fluoresceina_piorrubina_piomelanina
->Piocianina: azulado. ->Pioverdina (Fluoresceína): amarillo-verdoso.
->Piorrubina: roja. ->Piomelanina: marrón.
Credito: scielo

Pseudomonas_fluoresceina_luz_uv
En este medio de cultivo se muestra la fluorescencia de Pseudomonas sp. esta luminosidad se manifiesta en presecencia de luz uv, debido a la fluoresceina.
Credito: imageshack

...continúa leyendo "Pseudomonas aeruginosa, P. putida, P. fluorescens; Morfología, medios de cultivo, enfermedades y más."

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Klebsiella spp. forma parte de las enterobacterias, son bacilos, Gram (-) negativos, crecen en diversos medios de cultivo, son bacterias oportunistas, las especies importantes en la salud del humano son

Características Klebsiella.

Klebsiella spp. forma parte de las enterobacterias, son bacilos, Gram (-) negativos, crecen en  diversos medios de cultivo, son bacterias oportunistas, las especies  importantes en la salud del humano son:

  • K. pneumoniae,
  • K. ozanae,
  • K. rhinoscleromatis,
  • K. oxytoca.

Son bacterias de la  flora normal gastrointestinal, sin embargo su importancia médica radica debido  a que son oportunistas(osea se aprovechan del debilitamiento del sistema inmunológico) y pueden producir enfermedades nosocomiales como infecciones  respiratorias, urinarias, neumonías, etc.

Taxonomía bacteriana.

  • Reino: Bacteria
  • Filo: Proteobacteria
  • Clase: Gammaproteobacteria
  • Orden: Enterobacteriales
  • Familia: Enterobacteriaceae
  • Género: Klebsiella

Antecedentes.

En el mundo de la ciencia hay diversas maneras de nombrar a las bacterias, las  tres más comunes son dar nombre por una característica particular, como el  color, la enfermedad que causa, el olor,etc. otra manera es dar el nombre de  quien hizo el descubrimiento o una aportación valiosa, a estas bacterias se le  dio el nombre de un patólogo alemán llamado Theodor Albrecht Edwin Klebs,  debido a sus aportaciones en la bacteriología en 1885 se uso su nombre para  clasificar al género bacteriano "Klebsiella".

Edwin Klebs (1834-1913) vivió en la época de Pasteur y de Koch y en algún momento trabajo en el laboratorio de R. Koch.
Edwin Klebs (1834-1913) vivió en la época de Pasteur y de Koch y en algún momento trabajo en el laboratorio de R. Koch.

Mas información de Edwin Klebs: Institut für Pathologie der Universität Würzburg.

...continúa leyendo "Klebsiella pneumoniae, K. oxytoca, K. ozanae. morfologia, medio de cultivo, enfermedades y más"

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Características.

Dentro del género hay muchas especies, siendo las mas importantes desde el  punto de vista clínico: S.pyogenes, S. agalactiae y S. pneumoniae.

Tienen la capacidad de producir enfermedades infecciones en los humanos en especial en las vías  respiratorias altas (garganta faringe) y baja (pulmones), como por ejemplo la faringitis bacteriana, también pueden generar infecciones como la inflamación grave en los pulmones (neumonitis).

Taxonomía bacteriana.

  • Reino: Bacteria
  • Filo: Firmicutes
  • Clase: Bacilli
  • Orden: Bacillales
  • Familia: Streptococcaceae.
  • Género: Streptococcus

Principales especies: Streptococcus pyogenes (grupo A), Streptococcus agalactiae (grupo B), Streptococcus pneumoniae, Streptococcus mutans.

Hay ocasiones en la que se agrupan varias especies dependiendo una característica particular y aunque se trata de una pseudotaxonomía son ampliamente aceptadas por ejemplo: Grupo S. Viridans compuesto por S. sanguis, Streptococcus mitis, S. salivarius, S. milleri, S. mutans, entre otras. Generalmente forman parte de la cavidad oral, la mayoría son alfa hemolíticos.

Streptococcus-viridans-alfahemolisis
Streptococcus viridans en agar sangre donde se observa la coloración verde sobre la superficie del agar debido a la alfahemólisis de los eritrocitos (glóbulos rojos).

...continúa leyendo "Streptococcus pyogenes, S. agalactiae, S. pneumoniae morfología, medio de cultivo, enfermedades y mas."

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Las pruebas bioquímicas primarias son usadas para determinar el género de la mayoria de las bacterias.  Actualizado: 2015

  1. Tinción de GRAM.
  2. Prueba de catalasa.
  3. Prueba de oxidasa.
  4. Prueba de oxidación/fermentación conocida como OF.
  5. Motilidad.
Nota: Para identificar el género de las Enterobacterias se usan otras pruebas bioquimicas llamadas IMVIC que se compone de cuatro pruebas: Indol, Rojo de Metilo, Voges-Proskauer y Citrato.

Tinción de GRAM.

Fue creada en 1884 por el médico danes Hans Christian Gram, Esta tinción nos permite separar a la mayoría de las bacterias en dos grupos las gram positivas que se tiñen de color violeta y las gram negativas que se tiñe de color rosa. La diferencia en la tinción radica en las estructuras de la pared celular de las bacterias.

Pared celular de las bacterias Gram positivas.

Se observa la capa gruesa de peptidoglicano y la ausencia de lipopolisacaridos.Pared celular de las bacterias Gram positivas.

Se puede observar el entrecruzamiento de los acidos teicoicos
Se puede observar el entrecruzamiento de los ácidos teicoicos.


Pared celular de bacterias Gram negativas.

Se observa el lipolisacarido, y la poca cantidad de peptidoglicano.
Se observa el lipopolisacarido, y la poca cantidad de peptidoglicano.

Se observa bajo con tenido de peptido glicano y alto contenido de lipidos en forma de liposacaridos.
Se observa bajo con tenido de péptido glicano y alto contenido de lipidos en forma de lipopolisacaridos.


Reactivos usados en la tinción de Gram.

  • Agua estéril para realizar el frotis.
  • Cristal violeta también conocido como violeta de genciana.
  • Safranina.
  • Una mezcla de alcohol-acetona 1:1.
  • Agua corriente para enjuagar.

Técnica de la tinción de Gram.

De preferencia la tinción debe ser realizada sobre un recipiente para que los desechos sean desechados adecuadamente.

Frotis bacteriano.

  1. Con la ayuda de un mechero, flamear un asa bacteriológica hasta el rojo vivo y esperar a que enfríe un poco.
  2. Tomar con el asa una gota de agua estéril y agregarla en un portaobjetos.
  3. Flamear nuevamente el asa  y esperar a que enfríe.
  4. Tomar con el asa un poco de muestra bacteriana a partir de una colonia aislada.
  5. Después agregar la muestra en la gota de agua que esta en el portaobjetos y homogeneizar suavemente con movimientos circulares.
  6. Esperar que seque al aire libre o poner durante uno o dos segundos con la llama de un mechero para fijar la muestra, teniendo en cuenta que el calor no debe ser directo (sólo se pasa por la llama), puesto que el calor excesivo puede cambiar la morfología celular de las bacterias a observar.

Tinción.

  1. Agregar cristal violeta, solo el suficiente para que se cubra el extendido bacteriano.
    dejar actuar durante 60 segundos.
  2. Agregar el lugol, solo el suficiente, dejar actuar durante 60 segundos.
  3. Enjuagar con agua corriente.
  4. Agregar una o dos gotas de alcohol-acetona e inmediatamente enjuagar con agua corriente.
  5. Agrgar Safranina, solo la suficiente, Dejar actuar durante 60 segundos.
  6. Enjuagar con agua corriente.
  7. Dejar secar a temperatura ambiente.
  8. Observar en un microscopio óptico con un objetivo 100X usando aceite de inmersión.

Resumen de los pasos de la tincion de Gram.
Resumen de los pasos de la tinción de Gram.

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